分子間相互作用分析儀通過(guò)監(jiān)測(cè)分子間相互作用過(guò)程中的物理性質(zhì)變化(如質(zhì)量、折射率、頻率等),實(shí)現(xiàn)無(wú)標(biāo)記、實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)的相互作用分析。主要技術(shù)包括:
1、表面等離子共振技術(shù)(SPR)
原理:利用金屬薄膜表面折射率變化引起共振角偏移,推斷分子結(jié)合情況。
特點(diǎn):實(shí)時(shí)觀測(cè)結(jié)合/解離過(guò)程,提供動(dòng)力學(xué)(結(jié)合/解離速率)和親和力(平衡解離常數(shù))數(shù)據(jù),被譽(yù)為分子互作檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。
2、生物膜干涉技術(shù)(BLI)
原理:通過(guò)光在生物膜層干涉信號(hào)的變化檢測(cè)分子結(jié)合。
特點(diǎn):無(wú)流路設(shè)計(jì)、高通量、靈敏度高,適合小分子檢測(cè)。
3、微量熱泳動(dòng)技術(shù)(MST)
原理:通過(guò)檢測(cè)分子熱泳動(dòng)速度變化分析相互作用。
特點(diǎn):樣品消耗低、檢測(cè)速度快,適用于復(fù)雜溶液環(huán)境。
特點(diǎn):
無(wú)需標(biāo)記:許多分子間相互作用分析儀無(wú)需對(duì)樣品分子進(jìn)行標(biāo)記,可保持生物分子的天然活性,避免標(biāo)記對(duì)分子相互作用的影響。
實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè):能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)分子間的結(jié)合、解離過(guò)程,提供動(dòng)態(tài)的相互作用信息,如結(jié)合速率常數(shù)、解離速率常數(shù)等。
高通量:部分儀器可支持 96 孔板和 384 孔板,能同時(shí)平行檢測(cè)多個(gè)樣品,提高檢測(cè)效率。
可兼容粗制樣品:一些儀器可以在粗制、未純化的混合物,如細(xì)胞裂解液或雜交瘤上清液中測(cè)量分析物,減少了樣品預(yù)處理的步驟。