蛋白純化儀是一種用于分離和純化蛋白質(zhì)等生物分子的儀器,主要基于層析技術(shù)原理,利用不同蛋白質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)的差異,通過(guò)選擇合適的純化填料,如凝膠過(guò)濾層析填料、離子交換層析填料、疏水層析填料和親和層析填料等,在液體流動(dòng)動(dòng)力的作用下,使蛋白質(zhì)混合物在層析柱中進(jìn)行分離。
蛋白純化儀的操作要點(diǎn)與維護(hù)規(guī)范:
1、操作前準(zhǔn)備:
環(huán)境檢查:確保儀器放置平穩(wěn),遠(yuǎn)離振動(dòng)源和高溫環(huán)境。
緩沖液處理:所有緩沖液需用0.45 μm濾膜過(guò)濾,并超聲脫氣10分鐘,避免氣泡干擾泵運(yùn)行。
樣品預(yù)處理:離心或過(guò)濾樣品,去除顆粒物防止堵塞管路。
2、運(yùn)行中監(jiān)控:
壓力控制:設(shè)置報(bào)警閾值,避免柱床塌陷。
流速調(diào)節(jié):?jiǎn)?dòng)時(shí)從低流速逐步升高至目標(biāo)值。
檢測(cè)信號(hào):實(shí)時(shí)觀察UV基線穩(wěn)定性,排查氣泡或燈源老化問(wèn)題;電導(dǎo)率波動(dòng)可能提示緩沖液混合不均。
3、使用后維護(hù):
管路清洗:依次用純水(15分鐘)→20%乙醇(10分鐘)沖洗,防止生物殘留。
層析柱保存:按填料要求保存。
傳感器維護(hù):每周校正pH電極,清潔UV檢測(cè)器流通池,必要時(shí)更換光源。